La electroforesis es el término utilizado para estudiar la forma en que las partículas cargadas se mueven a través de un medio cuando se someten a un campo eléctrico. Las partículas viajarán a través del gel a diferentes velocidades, dependiendo de la carga transportada por la partícula y del tamaño de la partícula que debe pasar a través del medio algo restrictivo. El medio se hace intencionalmente restrictivo de modo que las partículas formarán un patrón en el medio que se puede analizar cuando se elimina el campo eléctrico. Esta técnica es valiosa en la investigación médica para separar ARN, ADN y proteínas en función de sus capacidades para moverse a través del gel. Use estos consejos para aprender cómo hacer un gel de electroforesis.

Pasos

  1. 1 Encuentra la concentración de gel requerida. Esto debe ser especificado por el médico y variará en función del tipo de prueba requerida por el estudio que realiza el médico. Las concentraciones comunes son 0.7 por ciento. 0.8 por ciento, 1.0 por ciento y 1.2 por ciento.
  2. 2 Obtenga una bandeja de colada de electroforesis en gel. Estas bandejas están disponibles en puntos de venta de suministros médicos. Tenga en cuenta el volumen de la bandeja, ya que determinará la cantidad máxima de gel de electroforesis que se puede hacer a la vez.
  3. 3 Reúna los químicos requeridos. Obtenga una cantidad suficiente de Tris-Acetate-EDTA (TAE) para compensar el volumen del gel que se está fabricando. La cantidad de agarosa, el polímero que forma el gel, dependerá de la concentración del gel que se va a hacer. El porcentaje de gel expresado es agarosa en gramos divididos por TAE en ml. El ingrediente final necesario es bromuro de etidio (EtBr). EtBr hace que el ADN sea visible bajo luz ultravioleta. Divida la cantidad de TAE utilizada por 1000 para determinar la cantidad de EtBr necesaria.
  4. 4 Agregue la agarosa. Agregue la cantidad determinada de agarosa a la cantidad requerida de TAE. Agite suavemente o agite la mezcla para garantizar una mezcla adecuada.
  5. 5 Prepara la mezcla La agarosa en TAE debe calentarse en un horno de microondas para disolverla. Caliente la solución por períodos cortos de tiempo, como 15 segundos, a baja potencia. Verifique el progreso de la fusión constantemente. Si el TAE se calienta hasta el punto en que se forma la materia particulada, el lote se arruinó.
  6. 6 Agrega el EtBr. EtBr es un poderoso riesgo biológico. Se deben usar guantes de laboratorio para esta parte del proceso. Agregue el EtBr después de que se haya completado el calentamiento del TAE. Agite suavemente o agite el recipiente para garantizar una mezcla adecuada. Deje reposar el líquido y deje enfriar durante 5 minutos.
  7. 7 Llena las bandejas de fundición Agite o revuelva la mezcla química para asegurarse de que haya una temperatura uniforme en toda la mezcla. Vierta la mezcla cuidadosamente en la bandeja de colada.
  8. 8 Inserta los peines. Coloque los peines de fundición en los rieles de soporte de la bandeja de colada. Los dientes del peine crearán pozos en el gel a los que se puede agregar la muestra que se va a probar. Los peines vienen en varios tamaños para crear pozos de varios tamaños. Los pocillos de tamaño que deben formarse serán determinados por el médico en función del estudio que se realizará.
  9. 9 Deje que las bandejas de colada se enfríen y que el gel se asiente durante 1 hora. Retire los peines de fundición. Retire el gel de la bandeja de colada. El gel de electroforesis ya está listo para usar.