Las pipetas son un tipo de equipo de laboratorio utilizado para medir y transferir volúmenes muy pequeños de líquido. La precisión y precisión en la medición de la pipeta son necesarias ya que cualquier discrepancia en los volúmenes dispensados ​​puede afectar los resultados de un experimento. Para garantizar la precisión, es necesario verificar la calibración de la pipeta cada pocos meses. El proceso de calibración ayuda a verificar si el equipo dispensa o no los volúmenes adecuados para que se pueda reparar si no es así.

Parte uno de dos:
Verificando la Calibración

  1. 1 Reúna los materiales necesarios. Para verificar la calibración de una pipeta, necesitará una pipeta, puntas de pipeta, agua destilada, un vaso de precipitados, un termómetro, un balancín y pesar los barcos. El resto debe ser específico para microgramos para calibrar micropipetas con un máximo de 1 μL.[1]
    • No necesitarás más de 5 ml de agua. Llena el vaso de precipitados con el agua.
    • Asegúrese de que las puntas de la pipeta sean las puntas correctas que se ajusten correctamente a la pipeta.
  2. 2 Mida la temperatura del agua destilada. Coloque el termómetro en el agua y déjelo por lo menos por un minuto. Si la línea roja del termómetro aún se está moviendo, déjelo por un minuto más. Después de un minuto, registre la temperatura en una computadora portátil. Retire el termómetro y séquelo cuando termine.[2]
    • Conocer la temperatura del agua es importante para los cálculos que se realizarán para verificar la calibración.
  3. 3 Coloque el bote de pesaje en la balanza y ponga a cero. Idealmente, usará un equilibrio que tenga puertas y sea una cámara aislada. Coloque el bote de pesar en la cámara y cierre las puertas. Si no tiene puertas, simplemente coloque el bote de pesaje en la balanza. Presione el botón "Cero" o "Tara" y espere hasta que la balanza indique cero.[3]
    • Poner a cero la escala resta el peso de la embarcación de plástico y te permite medir solo el peso de lo que coloques en la embarcación.
  4. 4 Prepare la pipeta para la calibración. Limpie la pipeta con etanol para eliminar cualquier contaminante antes de comenzar y asegúrese de que nada obstruya el extremo de la punta de la pipeta. Coloque la punta adecuada en el extremo y configure el volumen que desea probar.[4]
    • Para la calibración, pruebe el volumen más pequeño y el volumen más grande que la pipeta puede dispensar.[5]
  5. 5 Enjuague previamente la punta antes de la calibración. Presione el botón hasta la primera parada y pegue la punta en el agua destilada de modo que aproximadamente 2 mm estén sumergidos en el líquido. Suelta el botón para aspirar un poco de líquido y luego dispense el líquido presionando el botón. Repita esto tres veces para preenjuagar la punta.[6]
    • Presione el botón hasta el segundo tope para dispensar cualquier líquido que permanezca en la punta y retire la pipeta del agua.
  6. 6 Aspire el volumen de calibración. Con la punta fuera del líquido, presione el botón hasta la primera parada. Coloque aproximadamente 2 mm de la punta en el agua destilada y suelte el botón para aspirar el líquido en la punta. Espere aproximadamente 1 segundo antes de retirar la punta del agua.[7]
    • Asegúrese de que la punta esté completamente sumergida durante todo el proceso de aspiración. No quieres burbujas en la punta o los resultados serán incorrectos.
  7. 7 Dispense el líquido en el bote de pesar en la báscula. Coloque la punta contra la parte inferior del bote de pesaje y presione el botón hasta la primera parada. Muévase a otro lugar ligeramente alejado del agua y presione el botón hasta la segunda parada. Manteniendo presionado el botón, levante la punta lejos del bote de pesar.[8]
    • Mantenga la punta en la pipeta ya que la usará nuevamente para pesar más pruebas de calibración. Asegúrese de que la punta no toque nada.
  8. 8 Registre el peso en el equilibrio. Cierre la puerta si está utilizando un equilibrio de la cámara. Espere hasta que los números dejen de cambiar. Registre este número en su cuaderno.[9]
    • Es importante esperar hasta que el número se haya estabilizado antes de grabarlo. Sus lecturas serán incorrectas si no espera.
  9. 9 Repita este proceso para tomar al menos 10 lecturas. Ponga a cero la báscula, prelave la punta, aspire el mismo volumen, dispense el volumen y luego registre el peso. Desea tener múltiples grabaciones del mismo volumen y luego puede promediarlas todas juntas.[10]
    • Puede repetir este mismo proceso con diferentes volúmenes siempre que tome múltiples lecturas por volumen.

Parte dos de dos:
Cálculo de los resultados

  1. 1 Defina la fórmula para el volumen calculado. La fórmula para calcular el volumen dispensado por la pipeta es V = w * Z donde w es el peso del agua, Z es el factor de conversión basado en la densidad del agua, y V es el volumen calculado de la cantidad de agua dispensada .
    • Puede encontrar la variable Z buscando la densidad del agua utilizando la temperatura registrada al comienzo del experimento.[11]
    • Por ejemplo: si la temperatura del agua era de 23 ° C, entonces usará un valor de Z de 1.0035 μg / mg.
  2. 2 Promedio de las repeticiones juntas. Debería haber pesado el volumen de agua dispensado por la pipeta al menos 10 veces. Para promediar todos estos valores, agréguelos todos y divídalos entre 10. Si realizó más o menos ensayos, sume cada prueba y divida por el número total de ensayos.
    • Por ejemplo: Los diez pesos que registró para un volumen de pipeta de 10μL son los siguientes: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 y 9.98.
    • El promedio es: (9.89 + 10.01 + 10.02 + 9.99 + 9.95+ 10.04 + 9.96 + 10.01 + 9.99 + 9.98) / 10 = 99.84 / 10 = 9.984
  3. 3 Conecta las variables en la ecuación y resuelve. Una vez que haya determinado los números adecuados para cada variable, puede insertarlos en la ecuación y resolver el volumen calculado. Para resolverlo, simplemente multiplique el peso promedio de todas las pruebas por el valor Z.
    • Por ejemplo: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
  4. 4 Calcule la precisión de la pipeta. Para calcular la precisión, puede usar la ecuación A = 100 x Vpromedio/ V0, donde A es la precisión de la pipeta, Vpromedio es el volumen promedio calculado y V0 es el valor que configura la pipeta para dispensar. La precisión debe estar entre 99-101%.[12]
    • Si la pipeta está calibrada correctamente, el valor calculado debería ser muy cercano al valor real que estableció en la pipeta.
    • Por ejemplo: A = 100 x Vpromedio/ V0 = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.0019 = 100.19%
    • Esta pipeta en particular está calibrada correctamente.
  5. 5 Envíe la pipeta para la calibración, si es necesario. Si su pipeta no supera la prueba de calibración, deje de usarla para experimentos inmediatamente. Las pipetas son piezas muy delicadas y costosas de equipos de laboratorio. No puede reparar la calibración usted mismo, por lo que deberá enviarla para un mantenimiento adecuado. Alternativamente, algunas compañías vendrán a su laboratorio y calibrarán sus pipetas allí.[13]
    • Póngase en contacto con la empresa que fabrica su marca particular de pipeta para el servicio.